近年來，核酸檢測技術(shù)在我國得到逐步的推廣和應(yīng)用，并已成為血液篩選查實(shí)實(shí)驗(yàn)室的重要實(shí)驗(yàn)手段，但因其靈敏度高的特點(diǎn)，同時(shí)實(shí)驗(yàn)室也容易導(dǎo)致污染，特別是核酸的氣溶膠污染比較嚴(yán)重。如何預(yù)防和處理PCR核酸實(shí)驗(yàn)室污染?
 

核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果，這樣會(huì)對病人造成誤診，耽誤病情。如任由此情況發(fā)展，會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散，終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，如無備用實(shí)驗(yàn)室，會(huì)造成更大的損失。是否有一種快速*的解決方案呢？且看下面。
 

分子診斷是指利用分子生物學(xué)方法來檢測樣品中遺傳物質(zhì)的結(jié)構(gòu)或表達(dá)水平的變化從而做出相應(yīng)診斷的技術(shù)。由于分子生物技術(shù)的發(fā)展，人們生活水平不斷提高記憶對健康問題更為重視，分子診斷得以迅猛發(fā)展，*快速提高。我國分子診斷產(chǎn)業(yè)雖然起步較晚，但現(xiàn)已與歐美，日本，新加坡等起步較早的國家之間的的差距也越來越小。

而由于日常檢測中要處理大量的不同來源的核酸以及核酸本身難以降解的特性，核酸污染是困擾絕大多實(shí)驗(yàn)室的一個(gè)難題。微量的核酸污染會(huì)產(chǎn)生假陽性的檢測結(jié)果，這樣會(huì)對病人造成誤診，耽誤病情。如任由此情況發(fā)展，會(huì)形成氣溶膠污染而擴(kuò)散，終導(dǎo)致整個(gè)實(shí)驗(yàn)室的污染，嚴(yán)重的會(huì)關(guān)閉實(shí)驗(yàn)室，如無備用實(shí)驗(yàn)室，會(huì)造成更大的損失。
 

在與核酸污染長期抗?fàn)幹校藗円部偨Y(jié)出了一些預(yù)防和清除核酸污染的方法。對于預(yù)防，實(shí)驗(yàn)人員一定要不斷改進(jìn)并嚴(yán)格遵循實(shí)驗(yàn)室操作流程，對實(shí)驗(yàn)室不同操作進(jìn)行區(qū)域劃分，分裝試劑，定期對實(shí)驗(yàn)儀器進(jìn)行滅菌，實(shí)驗(yàn)室適當(dāng)通風(fēng)，養(yǎng)成實(shí)驗(yàn)中進(jìn)行陰陽對照的好習(xí)慣。
 

當(dāng)污染已經(jīng)出現(xiàn)，傳統(tǒng)的清除方法包括對可疑器用稀酸進(jìn)行擦拭或浸泡，紫外線照射，對反應(yīng)液用DNaseⅠ或內(nèi)切酶進(jìn)行處理等方法。這些方法對一些微量污染會(huì)有一定效果，但對污染效果不是很理想，而且紫外線照射會(huì)對人體造成一定的危害。

污染傳統(tǒng)處理方法：
　　準(zhǔn)備（1：50）、（1：10）高效消毒液，75%*。
　　2.5.1把STAR上的所有載架都拿出來，用1：50的高效消毒液進(jìn)行擦拭，待作用五分鐘后用清水沖洗。
　　2.5.2 SATR內(nèi)部用噴壺噴灑75%*，底部金屬部分可用1：50的高效消毒液進(jìn)行擦拭，待酒精*沉降后，用清水擦拭。
　　2.5.3實(shí)驗(yàn)室內(nèi)工作臺用1：10的高效消毒液進(jìn)行擦拭，實(shí)驗(yàn)室內(nèi)部用噴壺噴灑1：50的高效消毒液，等待空氣中的高效消毒液沉降后，用1：50的高效消毒液拖地，建議當(dāng)天不用清水擦拭或拖地，待第二天早上來再用清水擦拭拖地。
　　2.5.4實(shí)驗(yàn)室用的耗材（除用自封袋封好的），能滅菌的，均用備用滅菌鍋進(jìn)行一次滅菌。
    2.5.5機(jī)器通道污染的處理，將配置好的高效消毒液（1：50）代替裂解液，加入裂解液槽里，完成加裂解液的過程，在機(jī)器每次吸取一定量的高效消毒液后，暫停十分鐘，讓高效消毒液揮發(fā)到通道內(nèi)部，反復(fù)四次即可，這個(gè)過程中用的槍尖同樣不帶濾芯。后將裂解液槽里的高效消毒液（1:50）用水洗凈后換上蒸餾水重復(fù)以上程序。（此類方法正常情況下不建議使用，只有在污染去除不了時(shí)才慎重使用。用該方法處理過機(jī)器后，當(dāng)天不再做核酸實(shí)驗(yàn)）。

總之，對于核酸污染大家一定要給予足夠的重視，提前預(yù)防，不要等到污染已經(jīng)出現(xiàn)才想辦法清除，經(jīng)常在實(shí)驗(yàn)室中配備清除污染的試劑，發(fā)現(xiàn)污染可馬上進(jìn)行處理，相信這樣核酸污染將不再是讓眾多實(shí)驗(yàn)人員頭疼的問題。
注：實(shí)驗(yàn)室的污染不可能一次就清理干凈，需反復(fù)清理驗(yàn)證，直到實(shí)驗(yàn)結(jié)果能被采用為止。

核酸實(shí)驗(yàn)室污染的主要原因有：
1）標(biāo)本污染；2）試劑污染；3）產(chǎn)物污染；5）其他污染。
其解決措施為：其解決措施為：
1）標(biāo)本污染，重新采樣進(jìn)行檢測，評估標(biāo)本前處理環(huán)節(jié)；
2）試劑污染，更換新的試劑重新檢測評估；
3）設(shè)備污染，設(shè)備整體消毒清潔、維護(hù)；
4）產(chǎn)物污染，全面清潔消毒實(shí)驗(yàn)室、儀器設(shè)備所有實(shí)驗(yàn)有關(guān)用品。一旦發(fā)生污染后，圍繞實(shí)驗(yàn)室尋找污染源分析污染原因耗時(shí)且很繁瑣，所以防止污染重在預(yù)防。

因核酸實(shí)驗(yàn)室污染后極其難以清除，有可能造成實(shí)驗(yàn)室不能使用的風(fēng)險(xiǎn)。但是如果一旦出現(xiàn)核酸實(shí)驗(yàn)室污染，除了上面常規(guī)的消毒清潔方法之外，另外還有一種比較好使而且快速全面*的實(shí)驗(yàn)室空間滅菌方法。根據(jù)國外DNA研究所大量實(shí)踐證明空間熏蒸消毒確實(shí)有效去除核酸污染源，時(shí)間短、高效、安全、節(jié)省勞動(dòng)力等等優(yōu)點(diǎn)。此空間熏蒸消毒方法為法國過氧化氫干霧消毒技術(shù)，整體核酸實(shí)驗(yàn)室覆蓋，*，快速分解掉核酸污染源，消毒完后，隨著排風(fēng)即可清除而無殘留，省時(shí)省力。特別適用核酸實(shí)驗(yàn)室氣溶膠污染。

過氧化氫干霧消毒器的特點(diǎn)為：
1、滅菌效果好，生物指示劑挑戰(zhàn)降低6lg對數(shù)值，能*殺滅環(huán)境中的MRSA、VRE、結(jié)核分枝桿菌、芽孢、病毒和多重耐藥的革蘭陰性菌（鮑曼不動(dòng)桿菌）；
2、活性氫氧基團(tuán)能高效分解DNA、RNA污染源及核酸酶等分子物質(zhì)；
3、快速空間滅菌，比起噴霧或熏蒸所需要的時(shí)間更短，實(shí)現(xiàn)更快速的密閉空間滅菌措施，預(yù)防核酸實(shí)驗(yàn)室環(huán)境空氣污染及核酸片氣溶膠污染，及快速高效去除實(shí)驗(yàn)室核酸污染源；
4、小于3微米干霧氣體，擴(kuò)散性*，能擴(kuò)散到每一個(gè)角落，空氣中做布朗運(yùn)動(dòng)，消毒干霧*，專門對付小分子核酸污染源物質(zhì)；
5、消毒干霧相對一般過氧化氫穩(wěn)定，自然損耗小，維持的滅菌濃度均勻，基本不受溫度、環(huán)境濕度的影響（真正的干霧才能做到這點(diǎn)）；
6、無色無毒，無殘留，安全可靠，當(dāng)天使用消毒清除污染，當(dāng)天即可使用實(shí)驗(yàn)室，換回?fù)p失。

擴(kuò)展閱讀

申貝相關(guān)產(chǎn)品：

過氧化氫消毒器DS1001/1002

霧化效率：DS1001  2.5L  、 DS1002   5L

消毒劑以納微米級液珠的形式噴出達(dá)到對細(xì)菌芽孢6log殺滅效果360°環(huán)形消毒*

作用：

該產(chǎn)品應(yīng)用于對微生物限度有要求的空間區(qū)域的消毒，可直接殺滅細(xì)菌、真菌、病毒等各種微生物。

適用場所：

適用于生物安全實(shí)驗(yàn)室、GMP車間、傳染病房、學(xué)校、醫(yī)院、食品企業(yè)、科研院所等需要空間定期消毒的場所。消毒劑以納微米級液珠的形式噴出達(dá)到對細(xì)菌芽孢6log殺滅效果360°環(huán)形消毒*

PCR實(shí)驗(yàn)室核酸氣溶膠污染清除儀NC1001/NC1002

適用空間:NC1001,150-250立方米。NC1002,300-450立方米。

適用場所：

可用于醫(yī)院、生物化實(shí)驗(yàn)室、疾控、疲控、研究所、藥廠企業(yè)對微生物限度有要求的空間或物體表面的消毒殺菌，也可以用于分子生物學(xué)檢測實(shí)驗(yàn)室中核酸氣溶膠的去除和理化實(shí)驗(yàn)室氣態(tài)污染物的清除。

功能一：空間的消毒殺菌；

功能二：核酸氣溶膠的清除，清除率>99%；

功能三：甲醛、硫化氫、苯、氨氣等氣態(tài)污染物消除，是同時(shí)具有這三種功能的裝備，成為了分子實(shí)驗(yàn)室理化實(shí)驗(yàn)室*的設(shè)備。同時(shí)，PCR實(shí)驗(yàn)室核酸氣溶膠污染清除儀還具有自清潔功能，帶有HEPA過濾器及活性炭多層濾膜，完成消毒殺菌、核酸氣溶膠及氣態(tài)污染清除后，設(shè)備可自動(dòng)對空間的殘留微珠自動(dòng)吸附清除。

核酸氣溶膠污染清除儀可配備3%-35%的過氧化氫溶液用于空間的消毒,由于高于8%的過氧化氫易燃易爆,光購買不方便,而且運(yùn)輸、存儲都需要專業(yè)的車輛和專業(yè)的倉庫,該產(chǎn)品配備8%的過氧化氫消毒劑后,也可對空間微主物達(dá)到95%以上的殺滅效果。相對于市場上需要匹配高度(35%)的過氧化氫的消毒裝備(閃蒸、高溫加熱),在淚同的消毒殺菌效果基礎(chǔ)上,該設(shè)備使用安全,試劑匹配更容易,對使用人員要求更低,市場接受度也更高。配備的核酸氣溶膠清除劑后,核酸清除率大于99%,操作簡單,效果好。